ELISA試劑盒該怎么選擇，掌握這五個(gè)步驟

更新時(shí)間：2020-08-20

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　　ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應用，然而實(shí)驗新手們面對各種各樣、動(dòng)則上上千種的ELISA試劑盒，內心應該是崩潰的。

　　首先，你要明確研究種屬：

　　一般來(lái)說(shuō)，廠(chǎng)家都會(huì )在產(chǎn)品名稱(chēng)上標明種屬，且為單詞，檢索種屬的常用語(yǔ)言為英文。

　　如果您需對不同物種的同一因子進(jìn)行定量，建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的 ELISA 試劑盒。

　　其次，要明確樣本類(lèi)型：

　　不同廠(chǎng)家驗證樣本類(lèi)型不同，即使同一廠(chǎng)家不同試劑盒，其驗證樣本類(lèi)型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本，根據樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購買(mǎi)前需仔細核對。

　　第三步：要會(huì )預測自己的目標因子的濃度

　　一般來(lái)說(shuō)，待測因子可以根據經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍，且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門(mén)炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會(huì )顯著(zhù)增高，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。

　　因而，必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。

　　若濃度太低，可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測動(dòng)態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。

　　如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒，各類(lèi)型檢測范圍差異較大，需要根據實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。

　　第四步：檢查試劑盒進(jìn)行過(guò)哪些質(zhì)控

　　質(zhì)控數據在說(shuō)明書(shū)中即可找到，在購買(mǎi)前檢查試劑盒是否進(jìn)行過(guò)嚴格的質(zhì)控實(shí)驗，包括批次內(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗、線(xiàn)性稀釋實(shí)驗及交叉反應測試等，每個(gè)數據好都看一下，確保*的結果重現性及準確性。

　　第五步：確定需檢測的因子數量

　　如果待測因子超過(guò) 5 個(gè)，且樣本量較小時(shí)，單因子 ELISA 檢測方法并不是選擇。

　　建議考慮多因子檢測方法，如固相芯片(樣本數量一般 5 個(gè)以?xún)?，檢測指標可達上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個(gè)，檢測指標多達 50 個(gè))或微流控 ELISA 檢測系統 Ella。

　　可節約樣本及時(shí)間成本，也可保證檢測結果準確。

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