應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Elisa試劑盒水平。用純化的大鼠膠原酶IELISA試劑盒抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入膠原酶IELISA試劑盒，再與HRP標記的膠原酶IELISA試劑盒抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膠原酶IELISA試劑盒呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中大鼠膠原酶IELISA試劑盒濃度。
大鼠Elisa試劑盒標本要求：
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠Elisa試劑盒注意事項：
1.大鼠Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時(shí)請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.大鼠Elisa試劑盒底物請避光保存。
7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.大鼠Elisa試劑盒不同批號組分不得混用。
10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。