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植物Elisa試劑盒樣品處理和保存關(guān)鍵

更新時(shí)間:2018-06-25      瀏覽次數:1596
血清是常用的植物Elisa試劑盒標本之一,ELISA檢測中血漿一般可視為與血清同等的標本,標本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類(lèi);外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA測定的血標本的收集、儲存等不妥所形成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過(guò)久、標本凝聚 不全和采血管中添加物等影響。
因為植物Elisa試劑盒各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時(shí)釋放出許多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號的 ELISA測定中,會(huì )導致非特異性顯色,攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標本受細菌污染 :因菌體中可能含有內源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可發(fā)作非特異性顯色而攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標本保存不妥 :在冰箱中保存過(guò)久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可構成二聚體,在間接法ELISA測定中會(huì )導致本底過(guò)深、乃至形成檢測OD值偏高;標本凝聚不全;在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的要素許多,在考慮試劑要素和操作要素之外,也應從標本要素方面進(jìn)行剖析。
常見(jiàn)的植物Elisa試劑盒攪擾物質(zhì)有:類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
植物Elisa試劑盒類(lèi)風(fēng)濕因子 :血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)在ELISA檢測中,可與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致檢測OD值偏高。補體:ELISA體系中固相一抗和符號二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點(diǎn)被露出出來(lái),使C1q 能夠將二者連接起來(lái),然后形成檢測OD值偏高。嗜異性抗體;人類(lèi)血清中含有能與嚙齒類(lèi)動(dòng)物(如鼠等)Ig (s) 結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來(lái),也能形成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過(guò)高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過(guò)大等,均對ELISA測定成果有攪擾效果。
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植物Elisa試劑盒樣品處理和保存關(guān)鍵:
1、留神防止呈現嚴峻溶血,血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過(guò)氧化物的活性。
2、植物Elisa試劑盒樣本的收集及血清別離中要盡量防止細菌污染,一則細菌的生長(cháng),其所排泄的一些酶或許會(huì )對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用,二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì )對用相應酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性煩擾。
3、血清標本如是以無(wú)菌操作別離,則能夠在2——8℃下保存一星期,如為有菌操作,則主張冰凍保存,樣本的長(cháng)期保存,應在-70℃以下。
4、冰凍保存的血清標本須防止因停電等形成的重復凍融。
5、標本在保存中如呈現細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí),應堆積后取上清檢查。 
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