植物赤霉素含量檢測試劑盒-elisa方法

試劑盒性能：

1.樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值為0.95以上。

2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于10%和15% 。

檢測范圍：                                              

3.75 pmol/L - 120 pmol/L

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 pmol/L

實(shí)驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物赤霉素（GA）水平。用純化的植物赤霉素（GA）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入植物赤霉素（GA），再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物赤霉素（GA）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中植物赤霉素（GA）含量。

植物標本中相關(guān)酶或蛋白的測定：
1、 稱(chēng)取0.1g（誤差±3%以?xún)龋┬迈r植物組織樣本，在液氮中充分研磨；；
2、 加入樣品體積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩沖液）,
3、 請于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時(shí)保存于4度待用。