如何根據實(shí)驗物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
更新時(shí)間:2018-11-26
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如果實(shí)驗君的實(shí)驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個(gè)合適的http://wap.nmgldkj.com/相對容易,但如果您的實(shí)驗樣品來(lái)源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類(lèi)卻很少。且不可輕信能提供近萬(wàn)種試劑盒,覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時(shí),好要對待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。對于樣品類(lèi)型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過(guò)血清、血漿和細胞培養上清液的驗證。在選擇試劑盒時(shí),好要詳細閱讀說(shuō)明書(shū),比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會(huì )存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養上清中含胎牛血清等。因此需根據樣品來(lái)選擇試劑盒,必要時(shí)還要根據樣本來(lái)適當優(yōu)化?;蛟跇悠肥占?,好先閱讀一些可靠供應商試劑盒的說(shuō)明書(shū)或直接咨詢(xún)。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需要更謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數的商業(yè)化試劑盒沒(méi)有經(jīng)過(guò)多種來(lái)源組織樣本的驗證。這需要實(shí)驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(Matrix Effect)等。但如果實(shí)驗君要了解組織樣品的制備問(wèn)題,我們另起一文來(lái)總結。
根據樣品中檢測物水平來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
如果實(shí)驗君對于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數據,好選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應,有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過(guò)試劑盒的檢測范圍(標曲范圍), 也需做適當的倍數稀釋。在后計算結果時(shí),需乘以相應的稀釋倍數。
根據樣本可獲得性來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時(shí)更需謹慎。